Agar Mrs Lactobacillus

Características do Agar Mrs Lactobacillus

Especificações Técnicas

Instruções de Uso - Agar MRS

Revisão: 01 — Data: Dez/2019

Descrição

O Agar MRS é um meio de cultura indicado para crescimento de lactobacilos.

Composição (g/L)

• Dextrose: 20,00
• Peptona bacteriológica: 10,00
• Extrato de carne: 8,00
• Acetato de sódio: 5,00
• Extrato de levedura: 4,00
• Fosfato dipotássico: 2,00
• Citrato de amônio: 2,00
• Tween 80: 1,00
• Sulfato de magnésio: 0,20
• Sulfato de manganês: 0,05
• Ágar bacteriológico: 10,00

pH final: 6,2 ± 0,2 a 25°C

Preparação

1. Suspender 62 g do meio em 1 L de água destilada.
2. Misturar bem e dissolver sob aquecimento com agitação frequente.
3. Ferver por 1 minuto até completa dissolução.
4. Esterilizar em autoclave a 121ºC por 12 minutos.
5. Resfriar a 45–50ºC, misturar e dispensar em placas.

Instruções de Uso

1. Colocar 1 mL da amostra diluída em placa de Petri estéril.
2. Adicionar a primeira camada do meio resfriado (45-50ºC).
3. Após solidificar, adicionar uma segunda camada.
4. Incubar por até 3 dias a 35ºC ou até 5 dias a 30ºC.
5. Se possível, utilizar atmosfera de CO₂.
6. Manter atmosfera úmida para evitar ressecamento.
7. Acidificar com gotas de ácido acético se pH estiver > 6,0.

Usos

Meio seletivo desenvolvido por De Man, Rogosa e Sharpe para cultivo de Lactobacillus, Pediococcus e Leuconostoc. Substitui meios com suco de tomate.

Componentes funcionais:

• Citrato de amônio: inibe microrganismos não desejados.
• Fosfato dipotássico e acetato de sódio: tamponamento do pH.
• Tween 80: emulsificante.
• Sulfatos de magnésio e manganês: fontes de íons.
• Peptona e extrato de carne: nutrientes essenciais.
• Extrato de levedura: fonte de vitaminas do complexo B.
• Dextrose: carboidrato fermentável.
• Ágar: agente solidificante.

Colônias: pequenas, opacas, brancas, podendo ser compactas ou emplumadas.

Controle de Qualidade

• Solubilidade: Pó fino
• Cor do meio desidratado: Bege
• Cor do meio preparado: Âmbar levemente opalescente
• pH final: 6,2 ± 0,2 (25ºC)

Teste Microbiológico

• Incubação: 30 ± 1ºC por 72 ± 3h
• Inoculação: Produtividade (100 ± 2 UFC) / Seletividade (10⁴ – 10⁶ UFC)
• Meio de referência: MRS validado

Armazenamento

• Manter o frasco fechado após aberto para evitar hidratação.
• Temperatura de armazenamento: 2°C a 8°C

Referências

• Briggs M (1953) "An Improved Medium for Lactobacilli" J. Dairy Res. 20. 36-40.
• De Man, J.C., Rogosa, M., Sharpe, Elisabeth (1960) "A Medium for the Cultivation of Lactobacilli". J. Appl. Bact. 23. 130-135