Ficha Técnica – Ágar R2A
Modelo
K25-1071
Aplicação
Utilizado para a contagem de aeróbios totais em águas tratadas, especialmente na detecção de bactérias heterotróficas estressadas ou submetidas a tratamento com cloro.
Princípio e Uso
O Ágar R2A foi desenvolvido para contagens bacteriológicas em águas potáveis tratadas. Meios nutritivos ricos podem suprimir o crescimento de bactérias lentas ou estressadas, enquanto que o Ágar R2A, por ser menos nutritivo, aliado a temperaturas mais baixas e tempos de incubação prolongados, estimula o crescimento de organismos feridos ou tolerantes ao cloro.
Recomendado por normas internacionais, como a Farmacopeia Europeia (monitoramento de água para injetáveis) e os Métodos Padrões para exame de água e esgoto (APHA).
Composição (g/L)
- Glicose: 0,5
- Fosfato dipotássico: 0,3
- Piruvato de sódio: 0,3
- Amido: 0,5
- Extrato de levedura: 0,5
- Peptona Proteose No3: 0,5
- Hidrolisado de caseína: 0,4
- Sulfato de Magnésio Anidro: 0,024
- Ágar bacteriológico: 15,0
pH final (25°C): 7,2 ± 0,2
Preparo do Meio
- Suspender 18,12 g do meio em 1 litro de água destilada.
- Misturar bem e aquecer com agitação até ferver por 1 minuto (dissolução completa).
- Esterilizar em autoclave a 121°C por 15 minutos.
- Resfriar a 50°C, misturar bem e distribuir em placas de Petri estéreis.
Instruções de Uso
Segundo Métodos Padrões (APHA):
- Preparar diluições da amostra para contagem heterotrófica.
- Inocular as placas com técnica de espalhamento, vazamento ou filtração por membrana.
- Incubar a 20–28°C por 5–7 dias ou a 35°C por 5–7 dias.
Segundo Farmacopeia Europeia:
- Filtrar pelo menos 200 mL de água utilizando membrana com poro ≤ 0,45 µm.
- Transferir o filtro para uma placa com Ágar R2A.
- Incubar a 30–35°C por pelo menos 5 dias.
- Nível de ação: 10 UFC por 100 mL.
Uso Geral:
- Inocular diretamente placas com amostras de água (torneira, fontes).
- Usar técnica de placa em tiras ou filtração por membrana.
- Incubar a 35 ± 2°C por 24–72 horas.
Controle de Qualidade
Características Físicas
- Solubilidade: Solúvel
- Aparência do pó: Fino, bege
- Cor do meio preparado: Âmbar
- pH final (25°C): 7,2 ± 0,2
Testes Microbiológicos
Condições de inoculação: < 100 UFC | Incubação: 30–35°C / < 3 dias
| Microrganismo | ATCC | Resultado |
|---|
| Staphylococcus epidermidis | 12228 | Bom crescimento |
| Escherichia coli | 25922 | Bom crescimento |
| Staphylococcus aureus | 25923 / 6538 | Bom crescimento |
| Bacillus subtilis | 6633 | Bom crescimento |
| Escherichia coli | 8739 | Bom crescimento |
| Pseudomonas aeruginosa | 9027 | Bom crescimento |
Armazenamento
- Temperatura mínima: 2°C
- Temperatura máxima: 25°C
- Manter o frasco bem fechado para evitar hidratação do pó.
Descarte
O descarte do meio e de resíduos contaminados deve seguir as normas nacionais e regulamentações locais vigentes para resíduos biológicos.
Referências Técnicas
- American Public Health Association (1985) – Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater
- European Pharmacopoeia 9.0
