Manual de Instruções - Agar Citrato Simmons
Identificação
Produto: Agar Citrato Simmons
Revisão: 00
Data: Jan/2019
Descrição
Meio para diferenciação de Enterobacteriaceae com base na utilização do citrato, conforme ISO 10273.
Composição (g/L)
- Cloreto de sódio: 5,00
- Citrato de sódio: 2,00
- Di-hidrogenofosfato de amônio: 1,00
- Fosfato dipotássico: 1,00
- Sulfato de magnésio: 0,20
- Azul de bromotimol: 0,08
- Agar bacteriológico: 15,00
- pH final: 6,9 ± 0,2 a 25ºC
Preparo do Meio
- Suspender 24,3 g do meio em 1 litro de água destilada.
- Misturar bem e dissolver sob aquecimento e agitação frequente.
- Ferver por 1 minuto até completa dissolução.
- Dispensar em tubos de ensaio e esterilizar em autoclave a 121ºC por 15 minutos.
- Deixar esfriar em posição inclinada para formação de inclinações com 1–1,5 cm de profundidade.
- Alternativamente, o meio pode ser dispensado em placas de Petri.
Armazenamento
Meio em tubos: 2–8ºC. Em placas: 8–15ºC. Meio preparado: cor verde-azulado. Meio desidratado: homogêneo, de fluxo livre e coloração verde. Descartar se houver alterações físicas.
Usos
Utilizado para diferenciar bacilos entéricos Gram-negativos pela capacidade de utilizar citrato de sódio como fonte de carbono e sal de amônio como fonte de nitrogênio.
Recomendado para diferenciação de coliformes de água e amostras clínicas. Utilizado como alternativa ao caldo de citrato Koser nas reções IMVIC. O meio também é usado para distinguir entre cepas de Salmonella citrato positivas e negativas.
- Indicador de pH: Azul de bromotimol
- Fonte de carbono: Citrato de sódio
- Fonte de nitrogênio: Di-hidrogenofosfato de amônio
Instruções: Inocular a superfície da inclinação e perfurar a base. Incubar a 35 ± 2ºC por 24–48h. Organismos que utilizam o citrato apresentarão crescimento e coloração azul. Testes negativos mantêm coloração verde.
Escherichia coli, Shigella, Yersinia e Edwardsiella: Teste negativo
Serratia, Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella, Proteus, Providencia: Teste positivo
Salmonella enteritidis (positivo), Salmonella typhi/paratyphi A/pullorum/gallinarum (negativo)
Yersinia enterocolitica: Incubar a 30ºC por 24h. Resultado negativo (coloração permanece verde)
Se resultados insatisfatórios forem obtidos (ex: Providencia), prolongar a incubação por até 7 dias.
Teste Microbiológico
| Microorganismo ATCC | Crescimento | Cor do meio |
|---|
| Enterobacter aerogenes 13048 | Bom | Azul |
| Escherichia coli 25922 | Inibido | Verde |
| Salmonella enteritidis 13076 | Bom | Azul |
| Shigella dysenteriae 13313 | Inibido | Verde |
| Salmonella typhimurium 14028 | Bom | Azul |
| Salmonella typhi 19430 | Inibido | Verde |
| * Yersinia enterocolitica 27729 | Inibido | Verde |
* Inocular e incubar a 30ºC por 24 horas.
Armazenamento
Manter o meio em pó fechado após aberto para evitar hidratação.
Referências
- Simmons. J. Inf. Dis. 39:209, 1926
- Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 11ª Ed., APHA, 1960
- Edwards & Ewing, Enterobacteriaceae, USPHS, 1972
- Torregrosa and Ortiz, Pediatrics 59:35, 1961
- ISO 10273: Detecção de Yersinia enterocolitica patogênica
Símbolos
- Marçação CE
- Diagnóstico in vitro
- Certificação ISO
- Proteger contra umidade
- Proteger contra luz
- Observar limites de temperatura
